内容简介

神经生物学是生命科学的前沿,是应用神经解剖学、神经生理学、神经化学和分子生物学等多学科现代技术,对神经系统进行多层次综合研究的实验性科学。《神经生物学实验原理与技术》作为《生命科学实验指南系列》的重要分册,遵循理性思维与实际操作相结合的原则,全面而系统地介绍了神经生物学实验研究的方法学(第1篇),并将编著者20余年的有关科研成果转化为可操作的实验指导(第2篇),以及提供可供参考的有关实验研究信息(第3篇)。

目录


前言
1神经生物学实验方法学1
1.1科学思维方法学1
1.1.1科学技术的历史动力1
1.1.2辩证地去求索3
1.1.3辩证地去思考7
1.1.4辩证地去验证17
1.1.5辩证地去训练24
1.2实验设计方法学29
1.2.1选题30
1.2.2专业设计44
1.2.3对照设计54
1.2.4统计设计63
1.3实验分析方法学79
1.3.1数据整理79
1.3.2统计分析88
1.3.3专业分析100
1.3.4论文书写109
1.4电刺激方法学117
1.4.1电刺激的基本原理117
1.4.2电刺激的物理特性119
1.4.3神经制备的生物特性123
1.4.4选择性刺激127
1.4.5刺激电流扩散132
1.5电记录方法学136
1.5.1容积导体内记录136
1.5.2诱发电位记录143
1.5.3单单位记录150
1.5.4计算机辅助的记录158
1.5.5细胞内记录161
1.5.6膜片钳记录174
1.5.7神经纤维速度谱测定178
1.5.8轴突分叉点位置测定182
1.5.9压脚痛阔测定法187
1.6神经化学方法学190
1.6.1组织细胞破碎法190
1.6.2突触体制备193
1.6.3电泳法198
1.6.4色谱法203
1.6.5高效液相色谱法213
1.6.6微透析技术222
1.7化学神经解剖学方法学229
1.7.1免疫细胞化学技术229
1.7.2原位杂交组织化学技术239
1.7.3受体定位技术248
1.7.4免疫电子显微镜技术250
1.8神经形态学方法学253
1.8.1辣根过氧化物酶示踪技术253
1.8.2荧光素示踪技术260
1.8.3放射性核素示踪技术262
1.8.4顺行示踪技术269
1.8.5激光扫描共焦显微镜技术271
1.8.6定量及分析细胞学技术278
1.9分子神经生物学方法学282
1.9.1核酸分子杂交技术282
1.9.2蛋白质印迹法290
1.9.3DNA重组技术296
1.9.4聚合酶链反应技术306
1.9.5DNA序列测定技术313
1.9.6mRNA差异显示技术323
1.9.7基因芯片技术329
1.9.8转基因动物技术334
1.10神经行为学实验方法学338
1.10.1行为学实验的神经基础及常用动物339
1.10.2常用的高级脑功能研究方法340
1.10.3常用痛行为研究方法348
1.11.脑成像352
1.11.1计算机辅助体层摄影352
1.11.2磁共振成像356
1.11.3放射性核素断层成像362
1.11.4超声成像365
2神经生物学实验与示敬368
2.1神经生理学实验368
2.1.1家兔外周神经干复合动作电位记录368
2.1.2家兔后肢传人神经纤维速度谱370
2.1.3扩张肛门对猫慨神经后根放电的影响372
2.1.4大鼠脊髓节段性及下行性诱发电位记录374
2.1.5脊髓节段性缺血时脊髓诱发电位的变化375
2.1.6家兔大脑皮质体感诱发电位记录377
2.1.7脑缺血对家兔大脑皮质诱发电位的变化379
2.1.8瞻蛤离体脊神经节神经元静息膜电位与动作电位记录381
2.1.9大鼠培养脑细胞膜的电学特性384
2.1.10大鼠在体脊神经节神经元动作电位的细胞内记录386
2.1.11猫脊髓背索突触后神经元的细胞内与细胞外记录388
2.1.12猫脊颈束-背索突触后神经元的顺、逆向反应390
2.1.13大鼠脊髓背角神经元电活动的细胞内记录392
2.1.14大鼠脊孤柬-背索突触后神经元对躯体与内脏传人的反应394
2.1.15家兔中缝大核对外周传人刺激的反应397
2.1.16家兔丘脑腹后外侧核电活动的细胞外记录398
2.1.17躯体内脏传人在脊髓背角的相互作用400
2.1.18缺氧预适应鼠脑提取液对ATP敏感性饵电流的作用401
2.2神经化学实验408
2.2.1缺氧耐受小鼠脑匀浆提取液的抗缺氧作用408
2.2.2急性重复缺氧小鼠脑单胺类含量的变化411
2.2.3不同强度躯体刺激对家兔脑脊液中CaH、MgH含量的影响414
2.2.4不同强度躯体刺激对家兔脑脊液中单胶类含量的影响417
2.2.5兔脑内腺昔的微透析法测定420
2.2.6缺氧对小鼠大脑应质突触体LDH透出率的影响421
2.2.7低氧预适应小鼠脑匀浆提取液对PC12细胞的保护效应423
2.3神经组织免疫细胞化学实验425
2.3.1延髓背角和中缝太核内的P物质样阳性结构免疫细胞化学或免疫荧光细胞化学染色法425
2.3.2大鼠三叉神经节内阿片μ受体与降钙素基因相关肤共存的阳性神经元免疫荧光细胞化学双重标记染色法428
2.3.3大鼠延髓背角浅层内P物质样阳性终未与啻钙结合蛋白神经元的联系免疫荧光细胞化学双标染色及激光扫描共焦显微镜观察430
2.3.4面口部注射甲醒榕液后大鼠延髓背角内的FOS样阳性神经元观察一一免疫细胞化学染色法432
2.3.5大鼠中缝核簇内5起色胶样阳性神经元表达FOS蛋白一一免疫细胞化学双标染包法435
2.3.6大鼠延髓背角内向丘脑投射的FOS样阳性神经元逆行标记与免疫细胞化学双标染色法437
2.3.7大鼠三叉神经节内钙结合素mRNA阳性神经元的分布放射性核素标记的原位杂交组织化学法440
2.3.8大鼠中脑导水管周围灰质内的5-羟色胶样阳性亚微结构免疫电镜法444
2.3.9大鼠孤束核内GABA能纤维终末与F物质受体样阳性神经元的突触联系包埋前与包埋后免疫电镜双标记法446
2.3.10大鼠延髓背角内GABA能神经元与F物质能纤维终末的突触联系包埋前免疫电镜双标记法449
2.4神经形态学实验452
2.4.1大鼠脊髓灰质向孤束核的投射452
2.4.2猫脊髓背角神经元向外侧颈核和背索核的分支投射454
2.4.3大鼠脊孤束背索突触后神经元的超(亚)微结构455
2.4.4大鼠脊孤束背索突触后神经元对躯体感觉核与内脏感觉核的分支投射457
2.4.5大鼠脊髓立体定位磁控过半夹断模型459
2.4.6大鼠臂旁核向杏仁中央核的投射HRP逆行追踪方法461
2.4.7大鼠中脑导水管周围灰质向伏核的5-羟色胶能投射H即逆行迫踪与免疫细胞化学染色相结舍的双标记法464
2.4.8大鼠延髓背角内P物质受体样阳性神经元向丘脑胶状质核技射荧光素逆行追踪与免疫荧光染色相结合的双标记方法466
2.4.9大鼠中缝大核向脊髓背角和延髓背角的分支投射荧光素双标记法469
2.4.10中脑导水管周围灰质和中缝背核内5-羟色胶能神经元的下行分支投射荧光素双标记与免疫荧光染色相结合的三标记法472
2.4.11大鼠三叉神经脊柬核吻侧亚核向三叉神经运动核的投射一一植物凝集素(PHA-L)顺行示踪法474
2.4.12大鼠延髓背角浅层向臂旁外侧核及丘脑腹后内侧核的投射一-BDA顺行示踪法477
2.4.13大鼠中脑导水管周围灰质中缝大核三叉神经感觉核簇的间接投射PHA-L顺行示踪与HRP逆行追踪相结合的双标记法的光镜观察480
2.4.14大鼠中脑导水管周围灰质-中缝大核-三卫神经脊束核尾侧亚核的间接投射PHA-L顺行示踪与HRP逆行追踪相结合的双标记法的电镜观察483
2.4.15大鼠延髓背角向丘脑技射神经元与5-羟色胶阳性终末的突触联系HRP逆行追踪与免疫细胞化学染色双标记法486
2.4.16大鼠孤束核-臂旁核-中央杏仁核的同接投射通路——溃变与HRP逆行追踪相结合的双标记法489
2.5分子神经生物学实验492
2.5.1用差异显示法分离特异表达的基因片段492
2.5.2慢性缺氧培养细胞中缺氧诱导因子-1的提取与检测497
2.5.3大鼠三叉神经节总RNA的提取及cDNA的制备500
2.5.45-HT,受体亚型mRNA在大鼠三叉神经节的表达502
2.5.5乙酷胆碱转移酶在大鼠纹状体的表达及其DNA片段的回收505
2.5.6乙酷胆碱转移酶DNA片段的亚克隆507
2.5.7ChAT-pGEM重组质粒DNA的制备及限制性酶酶切分析510
2.5.8ChAT-pGEM重组质粒DNA序列的测定513
2.5.9乙酷胆碱转移酶表达蛋白的SDS聚丙烯酷胶凝胶电泳分析516
2.5.10乙酷胆碱转移酶在大鼠纹状体分布的Western印迹检测520
2.5.11.性激素对周围伤害性刺激诱导脊髓PPDmRNA表达上调的影响523
2.5.12坐骨神经部分切断后初级感觉神经元(背根节)的差异表达基因克隆526
2.6神经行为学实验530
2.6.1.一足致炎大鼠双足痛感受性的变化530
2.6.2甲醛溶液致炎大鼠疼痛行为的观察532
2.6.3神经反射在一足致炎大鼠非致炎足痛阔变化中的作用533
2.6.4体液因素在一足致炎大鼠非致炎足痛阑变化中的作用536
2.6.5急性缺氧预适应对小鼠缺氧耐受性的影响537
2.6.6麻醉与兴奋小鼠缺氧耐受性的变化539
2.6.7大鼠脊髓横断及半横断模型的复制541
2.6.8慢性束缚应激对大鼠空间学习记忆能力的影响543
2.6.9创伤后应激障碍模型大鼠的自发活动和焦虑水平检测548
3神经生物学资料552
3.1.神经生物学常见概念552
3.1.1.生物电学常见概念552
3.1.2.生物化学常见词汇558
3.1.3.细胞培养常见词汇561
3.1.4.分子生物学常见词汇565
3.2常用的实验方法570
3.2.1.电生理学仪器方法570
3.2.2动物实验的实施577
3.3实验动物常用数据589
3.3.1实验动物常用生理数据589
3.3.2实验动物常用麻醉剂与肌肉松弛剂589
3.4常用试剂、缓冲液、贮存液与酶的配制592
3.4.1组织培养常用试剂592
3.4.2电泳缓冲剂593
3.4.3常用贮存液
3.4.4常用酶的配制597
3.5常用限制性酶识别序列598
3.6常用细胞系、细胞培养基、抗生素603
3.6.1细胞系603
3.6.2常用培养液成分及配方

其他推荐